文献类型：期刊文章

作　　者：陈亮[1,2,3] 任随周[2,3] 许玫英[2,3] 孙国萍[2,3]

机构地区：[1]中国科学院武汉病毒研究所,湖北武汉430071 [2]广东省微生物研究所,广东广州510070 [3]广东省菌种保藏与应用重点实验室,广东广州510070

出　　处：《微生物学通报》

基　　金：国家863计划项目(No.2006AA06Z322);国家自然科学基金项目(No.30800031);广东省科技攻关项目(No.2007A020300007);广东省科技计划项目(No.2007A020903001);广东省科学院人才基金项目(No.200601)

年　　份：2009

卷　　号：36

期　　号：4

起止页码：551-556

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：本文考察了乳糖代替IPTG诱导三苯基甲烷类染料脱色酶TpmD在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性,分别对用乳糖作为诱导剂时的诱导时机、乳糖浓度、诱导持续时间和添加方式进行优化并与IPTG诱导的差异等方面进行了比较分析,确定了乳糖诱导的最佳条件。结果表明,在工程菌对数生长中期(OD600约为0.8)添加终浓度为0.4mmol/L的乳糖诱导6h的条件下能获得最大量的目的蛋白和菌体量。由于乳糖可以作为碳源被菌体利用,分批添加乳糖效果优于一次性添加。乳糖诱导条件下目的蛋白表达量占总蛋白的35.62%,与IPTG诱导条件下的35.03%无明显差异。乳糖诱导后外源蛋白的表达时间有所滞后,但收获的菌体量高于IPTG诱导,显示出了乳糖同样是一种T7启动子的廉价高效诱导剂,可以代替昂贵的IPTG用于脱色酶TpmD的规模化发酵,同时也为其他重组蛋白的生产提供了有益的参考和借鉴。

关 键 词：乳糖诱导 IPTG TpmD  T7启动子

分 类 号：Q78] S814.8]