文献类型：期刊文章

作　　者：刘转转[1] 王海龙[1] 殷国荣[1] 马广源[1] 张建中[2] 凡振伟[3]

机构地区：[1]山西医科大学医学寄生虫学研究所、寄生虫学教研室,太原030001 [2]中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,昌平102206 [3]山西医科大学第一临床医学院,太原030001

出　　处：《中国人兽共患病学报》

基　　金：国家自然科学基金(No.30640057)资助

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：4

起止页码：334-337

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的对刚地弓形虫peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和XhoI酶切位点,RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE进行鉴定,重组蛋白用Western blotting分析其免疫原性。结果从弓形虫RH株cDNA中扩增出591bp的TgPrx基因片段,并成功构建重组质粒pET30a(+)/TgPrx;SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中高效表达。重组蛋白的相对分子量约32kDa,Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别。结论RH株刚地弓形虫peroxiredoxin可在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有免疫原性,有望作为弓形虫疫苗的候选抗原。

关 键 词：刚地弓形虫 PEROXIREDOXIN 克隆 原核表达 免疫原性

分 类 号：R382.5]