文献类型：期刊文章

作　　者：孙岩[1] 张娟娟[1] 韩婷婷[1] 李东亮[1] 曹雪梅[1] 李武修[1] 高玉光[1]

机构地区：[1]潍坊医学院口腔医学院口腔医学研究所,山东潍坊261042

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30672316);山东省教育厅重点项目(J06L22)

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：4

起止页码：328-331

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:表达并纯化小鼠釉成熟蛋白(Amelotin),制备多克隆抗体,并进行初步鉴定。方法:RT-PCR获得Amelo-tin成熟肽片段,构建pET32a-Amelotin,IPTG诱导表达Amelo-tin,纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗体滴度。Western blot和免疫组织化学鉴定抗体特异性。结果:成功构建了Amelotin重组表达载体pET32a-Amelotin,表达的重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,得到的多克隆抗体ELISA显示抗体效价可以达到1∶12800。Western blot分析表明该抗体能特异结合Amelotin,免疫组化分析表明自制的抗体能特异的与Amelotin相互作用。结论:以纯化的Amelo-tin为免疫原,成功地制备了效价及特异性较高的兔抗Amelo-tin抗体,为进一步建立简便的Amelotin检测方法及研究Amelotin生物学功能奠定了良好的基础。

关 键 词：釉成熟蛋白  原核表达 多克隆抗体

分 类 号：R392.11]