文献类型：期刊文章

作　　者：刘涛[1] 杜丽[1] 王凤阳[1] 雷明[1] 崔克[2] 成鹰[1] 陈品林[1] 王轶[1] 林杰材[1] 满初日嘎[1]

机构地区：[1]海南大学农学院海口市动物基因工程重点实验室,海南海口570228 [2]海南省动物疫病预防控制中心,海南海口570203

出　　处：《中国兽医科学》

基　　金：国家自然科学基金项目(30660139);教育部留学回国人员启动基金项目(教外司留[2007]1108号);海南省教育厅高校科研项目(Hj200804)

年　　份：2009

卷　　号：39

期　　号：4

起止页码：310-315

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)抗体的间接ELISA诊断方法,将HEV ORF3片段克隆至大肠杆菌表达载体pET42a(+)中,构建了原核表达载体pET42a-ORF3,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,并对表达的融合蛋白进行Ni2+-NTA柱纯化及SDS-PAGE、Western-blot鉴定,用纯化的融合蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA检测方法。结果显示,GST-ORF3在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的蛋白质分子质量约为45.5 ku,具有良好的抗原性。用建立的间接ELISA检测190份猪血清样品,阳性率为84.7%,与试剂盒检测结果相比,阳性符合率为91.5%。表明,建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和灵敏性,可用于猪血清HEV抗体的检测。

关 键 词：猪戊型肝炎病毒 ORF3 原核表达 间接酶联免疫吸附试验

分 类 号：S852.659.6] R446.61[动物医学类]