文献类型：期刊文章

作　　者：戴鹏[1] 戴佳琳[2] 黄江[2] 廖兴江[2] 郎书源[2] 周灵贵[2] 申萍香[2]

机构地区：[1]贵阳医学院理化实验中心,贵州贵阳550004 [2]贵阳医学院多媒体形态学实验室

出　　处：《中国公共卫生》

基　　金：国家自然科学基金(30760227);贵州省科技攻关项目[黔科合NY字(2008)3060]

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：4

起止页码：398-400

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的通过筛选亚洲牛带绦虫(Taenia saginata asiatica)成虫cDNA质粒文库,识别半胱氨酸分泌蛋白(Ta CRISP),并进行克隆表达,为进一步研究其功能提供基础依据。方法用生物信息学方法从亚洲牛带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别TaCRISP的全长编码基因并预测编码蛋白质的各种结构与功能;将其编码区序列克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,测序鉴定重组质粒,之后进行诱导表达,表达产物经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。结果该基因全长1090bp,编码239个氨基酸,1aa-16aa位为分泌信号肽,理论分子量为26973.8,等电点为5.96。生物信息分析揭示,Ta CRISP与中殖孔绦虫CRISP一致性为38%,相似性为54%;所构建的重组体经PCR、双酶切及测序鉴定与目标基因相符。SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中表达成功。结论发现亚洲牛带绦虫Ta CRISP基因,成功构建重组原核表达质粒并表达出融合蛋白。

关 键 词：亚洲牛带绦虫 半胱氨酸分泌蛋白  分子克隆 原核表达 序列分析  

分 类 号：R383.32]