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牛双芽巴贝斯虫热休克蛋白基因外显子的克隆与原核表达
Cloning Exons of the Heat Shock Protein Gene of B.bigemina and the Construction of Recombined Prokaryotic Expression Plasmid
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐830052 [2]新疆农业大学继续教育学院,乌鲁木齐830052
基 金:国家自然科学基金项目(3066141)
年 份:2009
卷 号:32
期 号:1
起止页码:1-4
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、FSTA、IC、JST、PROQUEST、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:从患牛焦虫病的牛全血样品中抽提总RNA,通过设计特异性引物,经RT-PCR扩增牛双芽巴贝斯虫热休克蛋白20(HSP20)基因的外显子,将其插入pMD18-T载体进行测序、鉴定,构建原核表达质粒载体PGEX-4T-2-HSP20(exon)。试验结果显示牛双芽巴贝斯虫HSP20基因外显子已被成功克隆。该基因的外显子序列与国际标准株HSP20外显子的序列存在两个碱基的突变,导致其编码的蛋白质出现了一个氨基酸的变异。测序结果还表明,克隆出的牛双芽巴贝斯虫HSP20基因外显子已正向插入原核质粒表达载体PGEX-4T-2,成功构建了PGEX-4T-2-HSP20(exon)表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中的得到表达。
关 键 词:牛双芽巴贝斯虫 HSP20基因 热休克蛋白 原核表达
分 类 号:S851.723]
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