文献类型：期刊文章

作　　者：郑道君[1,2] 刘国民[1,2] 梁远发[3] 鄢东海[3] 令狐昌弟[3] 田永辉[3]

机构地区：[1]海南大学热带生物资源教育部重点实验室,海口570228 [2]海南大学苦丁茶研究所,海口570228 [3]贵州省茶叶科学研究所,湄潭564100

出　　处：《植物研究》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(39860048);贵州省自然科学基金资助项目(黔科合丁字[2005]2033号)

年　　份：2009

卷　　号：29

期　　号：2

起止页码：234-241

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：系统地研究了中国木犀科苦丁茶ISSR反应体系中的主要影响因子,建立了一套稳定的ISSR-PCR反应参数。筛选出了10个有效引物,并以中国木犀科苦丁茶8个物种共21份种质材料为供试材料对优化后的反应条件的重复性、多态性进行了检测。优化后的反应体系为:10×buffer2.5μL,2.0～3.0mmol·L-1 MgCl2,150～300μmol·L-1 dNTPs,Taq酶1.0～1.5U,引物0.4～0.5μmol·L-1,DNA模板5～320ng。PCR扩增程序为:94℃预变性4min,然后按94℃变性40s,50～54℃退火45s,72℃延伸120s,进行35个循环,最后72℃延伸8min。该反应条件可应用于中国木犀科苦丁茶亲缘关系和遗传多样性分析。

关 键 词：木犀科 苦丁茶 ISSR 影响因子  体系优化  

分 类 号：Q943[植物生产类]