文献类型：期刊文章

作　　者：张贺楠[1] 赖汉漳[1] 齐岩[1] 孔留五[1] 张小桃[1] 曹伟胜[1] 廖明[1]

机构地区：[1]华南农业大学兽医学院农业部动物重大疫病防控重点开放实验室,广东广州510642

出　　处：《中国兽医科学》

基　　金：国家自然科学基金项目(30771612)

年　　份：2009

卷　　号：39

期　　号：2

起止页码：173-177

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：根据GenBank上鸡α-、β-、γ-干扰素（ChIFNα-、β-、γ-）基因的序列，在保守区设计并合成各自特异引物，并以鸡3-磷酸甘油脱氢酶（GAPDH）基因为内参，采用SYBRGreen工染料以建立实时荧光定量PCR检测方法。将IFNα-、β-、γ-基因克隆至pGEM-T载体上，以各阳性质粒作为标准品，构建标准曲线，并进行了熔解曲线分析。结果表明，鸡IFNα-、β-、γ-和GAPDH基因的C1值与标准品稀释度在1×10^2～1×10^8 copies／μL范围分别呈良好的线性关系，r^2均大于0．990。熔解曲线分析表明，产物为特异的单峰，检测周期从RNA提取到荧光定量PCR结束只需4h。建立的鸡IFNα-、β-、γ-基N实时荧光定量PCR灵敏度高、特异性强、检测周期短，为在mRNA水平对鸡IFN的定量分析奠定了基础。

关 键 词：实时荧光定量PCR  鸡  Α-干扰素 Β-干扰素 γ-干扰素  

分 类 号：Q511] Q503