文献类型：期刊文章

作　　者：马可[1] 胡有谷[2] 齐宗华[2]

机构地区：[1]复旦大学附属华山医院急诊科,上海市200040 [2]青岛大学医学院,山东省创伤骨科研究所,山东省青岛市266003

出　　处：《中国组织工程研究与临床康复》

年　　份：2009

卷　　号：13

期　　号：2

起止页码：229-232

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、核心刊

摘　　要：背景:目前尚未见成熟的成年人退行性变椎间盘的细胞培养模型报道。目的:采用组织块细胞培养法及酶消化细胞培养法进行成人退行性变椎间盘细胞培养的可行性。设计、时间及地点:对比观察的细胞学实验,于1998-12/1999-04在青岛大学医学院山东省创伤骨科研究所完成。材料:5份标本来源于青岛大学附属医院骨科确诊为退行性椎间盘病变患者。方法:①组织块法培养椎间盘细胞:将组织块剪碎至小于1mm×1mm×1mm,牢固敷贴于培养瓶底壁上;第1份标本加入含青霉素100u/mL,链霉素100mg/L,体积分数为0.1的胎牛血清的HAMF12培养基,第18天培养基中胎牛血清的体积分数更换为0.2继续培养。第2份标本初始胎牛血清体积分数为0.2,其余条件与第1份相同。第50天用2.5g/L的胰蛋白酶溶液对细胞进行消化传代。②酶消化法培养椎间盘细胞:将组织块剪碎加入2.5g/L的胰蛋白酶溶液消化髓核30min,离心去除上清液;消化的组织加入2g/L的胶原酶,静止消化4h;离心直至胶原酶完全清洗干净;取离心沉淀物置于培养瓶中:第1份标本加入足量的含青霉素100U/mL,链霉素100mg/L,含体积分数为0.1胎牛血清的HAMF12培养基,第10天培养基中胎牛血清的体积分数更换为0.2继续培养;第2,3份标本初始胎牛血清体积分数为0.2,其余条件与第1份相同。第50天用2.5g/L的胰蛋白酶溶液对细胞进行消化传代。主要观察指标:细胞的传代情况,细胞的形态学、超微结构观察。结果:①在生长及增殖过程中,体积分数为0.2胎牛血清培养细胞增殖速度明显高于体积分数为0.1胎牛血清时的速度。②髓核软骨细胞多呈星形或多角形,细胞核偏于细胞的一侧而贴近细胞膜,来源于纤维环的成纤维细胞呈梭形,细胞核位于梭形细胞的正中央,细胞的纤丝较长。③来源于髓核组织的细胞透射电镜下可见两类形态、结构截然不同的细胞:脊索细胞和�

关 键 词：退行性变椎间盘  椎间盘细胞 细胞培养 脊索细胞  

分 类 号：R681]