文献类型：期刊文章

作　　者：张妙彬[1] 潘丽晶[1] 范干群[1] 陈继敏[1] 程萍[1]

机构地区：[1]珠海市农业科学研究中心,珠海519070

出　　处：《分子植物育种》

基　　金：supported by the Science and Technology Plan Project in Guangdong Province of China ( 2006B20130004)

年　　份：2009

卷　　号：7

期　　号：1

起止页码：209-214

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：在石斛兰转基因研究中,需通过PCR和Southern杂交等手段检测外源基因是否转入并整合到转化植株基因组。由于转化石斛植株生长缓慢,且含有多糖,因此从转化植株中提取高质量的基因组DNA以尽快对转基因苗进行分子检测存在较大困难。本研究旨在通过改良现有的DNA提取法(CTAB法或SDS法),克服转化石斛植株基因组DNA提取中碰到的产量低,纯度不高而导致难以进行PCR或酶切等问题。在本研究所用的3种改良法中,方法Ⅱ能从少量的转化石斛苗中提取出高产量和高纯度的基因组DNA。研究结果表明方法Ⅱ提取的基因组DNA完全适用于转基因石斛的外源基因PCR扩增,限制性酶切和Southern杂交分析。

关 键 词：石斛兰 DNA提取 多糖  PCR  SOUTHERN杂交

分 类 号：S682.31]