文献类型：期刊文章

作　　者：陈强[1] 陈思礼[2] 郑芳[1]

机构地区：[1]武汉大学第二临床学院基因诊断中心,武汉430071 [2]中南民族大学生命科学学院,武汉430074

出　　处：《中南民族大学学报（自然科学版）》

基　　金：湖北省杰出青年基金资助项目(2006ABB009)

年　　份：2008

卷　　号：27

期　　号：4

起止页码：40-43

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAS、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:构建人晶状体蛋白CRYAB基因与真核表达载体pIRES2-DsRed-Express的重组体,为研究人晶状体蛋白CRYAB基因的功能奠定基础.方法:根据人晶状体蛋白CRYAB基因的核苷酸序列,设计并合成分别带有酶切位点的引物,从pMD 18T-CRYAB基因克隆载体中扩增出CRYAB基因外显子片段,与载体pIRES2-DsRed-Express连接构建人晶状体蛋白CRYAB基因的表达载体,转化入大肠杆菌DH5α中.经抗生素筛选阳性克隆,通过酶切图谱分析、菌落PCR和测序鉴定所构建的表达载体.结果:构建的载体经PCR、酶切鉴定和测序证实插入方向正确,表达阅读框正确,载体构建成功.结论:重组人晶状体蛋白CRYAB基因表达载体的构建为研究CRYAB基因的功能及进一步研究先天性白内障的发病机制奠定了基础.

关 键 词：CRYAB基因  载体构建  鉴定  基因功能 机制  

分 类 号：Q784]