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幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统HP0527-C基因的克隆表达及其生物学功能的初步研究
Cloning,Expressing and Analysis of Biological Function of HP0527-C of Type IV Secretion System in Helicobacter Pylori
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]江苏大学医学技术学院病原生物学系,镇江212013 [2]吉林省吉林市吉化总医院一院,吉林132013
基 金:江苏省科技厅项目(BS2004021);江苏大学高级人才资金(2004008)资助项目
年 份:2008
卷 号:28
期 号:11
起止页码:82-88
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:为克隆表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC 11637 hp0527-c基因,探讨其生物学功能。设计引物扩增,T-A克隆,测序正确后构建表达载体pET-28a-hp0527-c,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后以Ni2+-NTA柱获得纯度为98%重组蛋白。经Western blot鉴定正确后,免疫新西兰大白兔获得了较高滴度的多克隆抗体;将重组蛋白作用于BGC-823细胞,RT-PCR检测细胞IL-8mRNA表达增高;同时用MTT法来检测重组蛋白对细胞增殖的影响,结果表明其活性呈现一定量的时间和剂量依赖性。已成功克隆了HP0527-C的重组蛋白,初步探讨了其与细胞之间的相互作用,为进一步阐明H.pylori致病机制奠定了基础。
关 键 词:幽门螺杆菌 克隆表达 细胞因子 细胞增殖
分 类 号:Q789]
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