文献类型：期刊文章

作　　者：张建成[1] 陶能国[1] 仝铸[1] 邓秀新[1]

机构地区：[1]华中农业大学园艺林学学院/作物遗传改良国家重点实验室,武汉430070

出　　处：《中国农业科学》

基　　金：国家"973"项目(2006CB708202);教育部创新团队专项(IRT0548)

年　　份：2008

卷　　号：41

期　　号：10

起止页码：3200-3207

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、FSTA、GEOBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：【目的】克隆、分析‘红肉脐橙’(Citrus sinensis Osbeckcv.Cara Cara)八氢番茄红素合成酶(phytoenesynthase,PSY)基因,并进行原核表达。【方法】以‘红肉脐橙’果实中分离的mRNA为模板,通过RT-PCR扩增到PSY cDNA片段,并分析其序列;利用PCR技术获得‘红肉脐橙’PSY cDNA的编码区全长,并将其克隆到原核表达载体pET28a(+),获得重组质粒pET-CitPSY转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。【结果】‘红肉脐橙’PSY cDNA长1520bp,最大开放读码框为1308bp,可编码436个氨基酸,核酸序列及其推导的氨基酸序列与已知其它植物PSY核酸、氨基酸序列之间的相似性分别在75%和70%以上,并且发现‘红肉脐橙’PSY的N末端存在转运肽信号序列,成熟的PSY包含1个跨膜结构域。原核表达获得了具有较高表达水平的融合蛋白6×His-PSY,Western-blot试验证实表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应,分子量约为52kD。【结论】该研究为进一步开展柑橘果实色泽分子改良奠定了基础。

关 键 词：红肉脐橙 八氢番茄红素合成酶 原核表达

分 类 号：S666]