文献类型：期刊文章

作　　者：艾敏[1] 张巧[2] 赵国强[1] 杨胜利[3]

机构地区：[1]郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州450001 [2]郑州大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,郑州450001 [3]郑州大学基础医学院食管癌研究室,郑州450001

出　　处：《郑州大学学报（医学版）》

年　　份：2008

卷　　号：43

期　　号：5

起止页码：943-947

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSA、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:构建表达B7.2和MAGE-1的绿色荧光共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,并在真核细胞中表达。方法:根据GenBank中的序列,对B7.2、MAGE-1各设计一对两端带有特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,将两扩增产物分别克隆在pGEM-T载体,经测序证实碱基序列无误后,双酶切pGEM-T载体,回收目的片段,将两目的片段亚克隆至真核绿色荧光蛋白共表达载体(pEGFP-C3)上,并转染真核细胞,观察其在真核细胞中表达。结果及结论:pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体经酶切及基因序列分析验证,PCR扩增片段与选择的目的片段序列相符,pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体构建成功。该表达载体转染EC9706细胞后,用免疫荧光显微镜观察和RT-PCR分析,该重组载体能够在真核细胞中广泛表达。

关 键 词：B7.2 MAGE-1 真核表达载体 肿瘤免疫

分 类 号：Q782]