文献类型：期刊文章

作　　者：乔祖健[1] 王亮[2] 李媛[2] 陈超[2] 辛九庆[2] 李继昌[1]

机构地区：[1]东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室,黑龙江哈尔滨150001

出　　处：《中国兽医科学》

基　　金：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金项目(2007)

年　　份：2008

卷　　号：38

期　　号：8

起止页码：701-706

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：以肺炎霉体体(Mhp)Yin-1株为模板,利用所合成的引物扩增了伴侣蛋白DnaK(热休克蛋白Hsp70)C末端基因,将得到的目的片段分别克隆至表达载体pET-28a和pGEX-6P-1中,原核表达获得了重组蛋白6P-1-DnakC和28a-DnakC,经Western-blot分析,均能被Mhp抗血清识别。以28a-DnakC作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法,以6P-1-DnakC为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠。筛选和鉴定了2株分泌抗DnaK的杂交瘤细胞株,命名为1AD10、2AF11。Western-blotting结果表明,这2株单抗与Mhp发生特异性反应而不与其他相关霉形体发生反应。抗体亚类鉴定结果显示,1AD10、2AF11分别为IgG2b和IgG2a亚类,且轻链均为κ链。相加ELISA试验表明,2株单抗能识别不同的抗原表位。

关 键 词：猪肺炎霉形体 伴侣蛋白DnaK  热休克蛋白70 单克隆抗体

分 类 号：S852.62] Q813.2[动物医学类]