文献类型：期刊文章

作　　者：秦伟[1] 黄昆仑[1] 贺晓云[1] 李欣[1] 许文涛[1] 林希瑾[1] 罗云波[1]

机构地区：[1]中国农业大学食品科学与营养工程学院食品生物技术实验室,北京100083

出　　处：《食品科学》

基　　金：国家863计划项目(2006AA10Z440);农业部948项目(2005-Z32)

年　　份：2008

卷　　号：29

期　　号：7

起止页码：267-271

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EI、FSTA、IC、JST、RCCSE、RSC、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：通过PCR从克隆载体pUC18-3Z/Cry2A*上扩增水稻偏爱型密码子优化的抗虫基因cry2A*,经限制性内切酶NdeI和BamHI双酶切定向插入到原核表达载体pET-28a(+),成功构建了在表达蛋白的N端只带有6个组氨酸标签的融合蛋白表达载体pET-28a(+)/Cry2A*,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。通过对其表达条件进行优化,发现在IPTG浓度为0.05mmol/L、诱导时间为3h、诱导温度为20℃的表达条件下目的蛋白大部分以可溶形式进行表达。采用Ni-NTA亲和柱纯化得到高纯度目的蛋白,薄层扫描分析蛋白纯度达到95%。

关 键 词：抗虫基因 cry2A^＊  转基因水稻 表达  纯化

分 类 号：TS201.1]