文献类型：期刊文章

作　　者：姜玲[1] 秦长平[1] 伏卉[1]

机构地区：[1]华中农业大学园艺林学学院国家果树脱毒种质资源室内保存中心,教育部园艺植物生物学重点实验室,武汉430070

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.30571277)资助

年　　份：2008

卷　　号：16

期　　号：3

起止页码：526-529

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：设计含有attB侧翼序列的引物,用于番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus)的外壳蛋白基因(CP)基因的PCR扩增。在BP重组酶的作用下,将CP基因与受体载体pDONRTM221发生重组反应,产生入门克隆。在LR重组酶作用下,将入门克隆与目的载体pHellsgate12发生重组反应,再进行平板培养筛选及PCR扩增和酶切反应。结果证明,用限制性内切酶XhoⅠ酶切消化后,琼脂糖凝胶电泳获得了预期长度为1700bp的重组片段;以启动子和外壳蛋白基因及外壳蛋白基因和终止子序列为基础,分别设计2对引物,经PCR扩增分别获得582和773bp片段。结果表明,获得了含有内含子的CP基因反向重复结构的表达载体。

关 键 词：番木瓜环斑病毒 反向重复序列  重组  Gateway^TM  

分 类 号：S188]