文献类型：期刊文章

作　　者：胡春华[1] 徐磊[1] 马先锋[1] 龙桂友[1] 刘昆玉[1] 邓子牛[1]

机构地区：[1]湖南农业大学园艺园林学院,国家柑橘改良中心长沙分中心,长沙410128

出　　处：《园艺学报》

基　　金：湖南省重大科技专项(05NK1002)

年　　份：2008

卷　　号：35

期　　号：6

起止页码：811-818

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：用PCR法扩增位于柑橘溃疡病菌致病基因pthAC-末端的3个核定位信号序列,并将其克隆到原核表达载体PET32a(+)上,经双酶切及核酸序列测定重组质粒(pthA-NLS),其序列与GenBank中pthA的相关序列有99.9%的同一性。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导了重组多肽的表达,并用Ni2+-NTA纯化柱得到了48kD的纯化重组多肽。把重组多肽注入免疫Balb/c小白鼠,制备了相应的抗血清,Western blotting和ELISA分析结果表明,抗血清可特异地结合重组多肽,亦可识别溃疡病菌PthA天然蛋白,获得的抗血清可以用于柑橘溃疡病的检测。利用抗血清与溃疡病菌混合接种离体冰糖橙叶片,发现抗血清能推迟溃疡病菌的致病过程,且病斑比对照小,但未能达到抗病程度。pthA基因末端核定位信号序列的克隆、原核表达及抗血清的制备为进一步研究pthA的致病机理和研发溃疡病快速分子检测技术奠定了基础。

关 键 词：柑橘 溃疡病 pthA  抗血清 病害抑制  

分 类 号：S666]