文献类型：期刊文章

作　　者：王瑞恒[1] 刘利民[1] 赵金玲[1] 孙学科[1] 孙琳琳[1] 周刚[1]

机构地区：[1]中国医科大学法医学院

出　　处：《法医学杂志》

基　　金：辽宁省教育厅资助项目(20060976;2005L204);大连市科技攻关项目(06E21SF081)

年　　份：2008

卷　　号：24

期　　号：3

起止页码：189-193

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的建立一种新方法,对多个单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)位点进行分型。方法基于等位基因特异性PCR原理,采用荧光标记复合扩增和毛细管电泳技术,根据PCR片段长度差异进行分型。选择SNP位点共11个,每个SNP位点设计两条长度不同、3’末端分别与SNP两个等位基因碱基配对的上游引物,同时为了增加特异性,在两条等位基因上游引物的3’末端第3或第4位碱基人为引入错配。在距离上游引物100～300bp范围内的合适位置,设计下游共用引物,并进行荧光标记。所有位点经过复合扩增后,PCR产物经ABIPrismTM310型遗传分析仪电泳分离,确定每个SNP的基因型。结果每个SNP位点纯合子为单一产物峰,杂合子则为长度不同的两个产物峰。不同的SNP位点扩增产物长度不同,根据产物长度和产物峰的数量进行SNP分型,一次完成11个SNP位点分型,其结果与直接测序完全一致。结论荧光标记复合扩增片段长度差异等位基因特异性PCR法是一种简单快速而有效的SNP分型新方法。

关 键 词：法医生物学  单核苷酸多态性 等位基因特异性PCR  复合扩增

分 类 号：R392.12] R394[基础医学类]