文献类型：期刊文章

作　　者：战爱斌[1] 胡景杰[1] 胡晓丽[1] 王明玲[1] 彭薇[1] 李艳[1] 李纪勤[1] 包振民[1]

机构地区：[1]中国海洋大学海洋生命学院海洋生物遗传与种质工程实验室,山东青岛266003

出　　处：《水产学报》

基　　金：国家"十一五"支撑计划项目(2006BAD09A09);国家科技基础条件平台建设(2005DKA30470);农业科技成果转化资金项目(2006GB23600451)

年　　份：2008

卷　　号：32

期　　号：3

起止页码：353-361

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：应用微卫星富集文库——菌落原位杂交法，筛选得到了40个栉孔扇贝的微卫星标记。用固定了（AG）15和（AC）15探针的尼龙膜（HybondN^＋）捕捉含有微卫星DNA的片段，经洗脱、PCR扩增和TA克隆，构建栉孔扇贝的微卫星富集文库。利用ECL试剂盒（Amersham公司）标记的（AG）15和（AC）15探针进行菌落原位杂交筛选微卫星富集文库，阳性克隆经测序获得微卫星DNA。富集文库中1200个重组克隆经过菌落原位杂交后，532个（44．3％）为阳性克隆。任意挑选100个克隆测序，结果显示所有的克隆都至少含有一个微卫星位点。利用软件设计了65对特异性PCR引物，40对能扩增出清晰的带谱；利用48个栉孔扇贝个体评价微卫星位点，分析表明37个位点具有多态性。不同的位点获得的等位基因数目为2～14个不等，37个多态性位点共获得258个等位基因，平均每个位点获得7．0个等位基因。观测杂合度（H0）、期望杂合度（HP）及多态性信息含量值（P配）的范围分别为0．1000-1．0000、0．1197-0．9831和0．1172-0．9782。结果表明，富集文库一菌落原位杂交法适合大规模筛选目标物种的微卫星标记。

关 键 词：栉孔扇贝 富集文库 菌落原位杂交  微卫星标记 多态性

分 类 号：S917[水产类]