文献类型：期刊文章

作　　者：杨波[1] 董小敏[2] 蔡大威[2] 刘志刚[1] 胡征[1] 汪浩勇[1] 张珈敏[2] 胡远扬[2]

机构地区：[1]湖北工业大学生物技术系,武汉430068 [2]武汉大学病毒学国家重点实验室,武汉430072

出　　处：《昆虫学报》

基　　金：湖北工业大学博士科研启动基金

年　　份：2008

卷　　号：51

期　　号：5

起止页码：486-491

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为了研究蟑螂Periplanetafuliginosa浓核病毒(pfDNV)非结构基因转录调控的机制,用PCR的方法从蟑螂浓核病毒基因组DNA中扩增了非结构蛋白基因ns3翻译起始密码子上游325bp的启动子序列;并进一步以其作为模板,利用聚合酶链式反应技术,得到6个不同长度的启动子片段和两个定点突变体片段,构建由其驱动的萤火虫荧光素酶基因报告质粒,在脂质体介导下转染多种昆虫细胞,体外分析了该启动子的活性。结果表明:该325bp DNA片段在Sf9,S2,Tn368及Ld652细胞中均具有较高的启动子活性;其转录起始基序CAGT对维持该启动子的基本转录活性而言是必需的,而TATA盒对此则是非必需的,但它的存在可显著提高启动子的转录活性。同时,我们还发现,病毒非结构蛋白NS1对该启动子具有反式激活作用,并且这种激活作用的大小取决于NS1蛋白在细胞中的浓度。

关 键 词：蟑螂浓核病毒  启动子 反式激活 昆虫细胞 表达载体  

分 类 号：Q965.9]