文献类型：期刊文章

作　　者：王守立[1] 姚辉华[2] 董亮[1] 邓敏[1] 顾永平[1] 孙茂民[3]

机构地区：[1]苏州大学医学部病理学教研室,江苏苏州215123 [2]苏州大学附属第二医院普外科,江苏苏州215004 [3]苏州大学医学部人体解剖学教研室,江苏苏州215123

出　　处：《苏州大学学报（医学版）》

基　　金：江苏省自然科学基金(DK2006540);江苏省高校自然科学基金(Q2134605);江苏省资助经费招收博士后基金(51208)资助项目

年　　份：2008

卷　　号：28

期　　号：2

起止页码：222-225

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、IC、核心刊

摘　　要：目的探讨脂质体介导的转化生长因子β1(TGF-β1)短发夹RNA(shRNA)在人肿瘤细胞株的转入效率,为研究TGF-β1信号转导在肿瘤微环境中的作用机制提供方法依据。方法化学合成TGF-β1小干扰RNA(siRNA),与脂质体转染介质混合制备转染复合物(Lip-shRNA),处理细胞24h后用流式细胞术(FCM)及人工计数法测定RD细胞的转入率;免疫荧光技术检测细胞TGF-β1蛋白表达水平。结果荧光显微镜观察硫代磷酸化修饰的寡核苷酸转入4h后,shRNA主要定位在细胞浆,8h后细胞核中有较多的shRNA;FCM测得转入细胞转入率与Lip-shRNA复合物呈剂量依赖关系,人工测得shRNA的转入率与转入复合物在低剂量呈剂量依赖关系,但在高剂量时增高不明显。转入6d后各组细胞TGF-β1蛋白表达量较转入3d时明显减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脂质体介导的TGF-β1shRNA在常见肿瘤细胞株中的转入效率与寡核苷酸的稳定性、Lip-shRNA复合物剂量、转入时间密切相关,该转染技术可以作为RNA干扰手段研究TGF-β1信号转导的病理学机制。

关 键 词：RNA干扰 TGF-Β1 肿瘤微环境 方法  

分 类 号：R730.264]