文献类型：期刊文章

作　　者：李启明[1] 马学军[1] 高寒春[2] 周蕊[1] 匡治州[1] 侯云德[1]

机构地区：[1]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室,北京100052 [2]北京金迪克生物技术研究所,北京100176

出　　处：《病毒学报》

基　　金：科技部禽流感防治重大专项(2004BA519A47,2004BA519A34)

年　　份：2008

卷　　号：24

期　　号：3

起止页码：178-184

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：建立一种便捷、灵敏的检测方法,即逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)用于H5N1亚型禽流感病毒基因检测。该技术使用特异对应于靶序列中8个基因区段的6条特异引物,在等温条件下进行核酸扩增反应。对51份实验感染动物及病毒培养标本的H5N1亚型禽流感病毒的HA、NA基因区进行了RT-LAMP检测,并以SYBR Green I为反应指示剂进行了逆转录环介导等温核酸扩增技术,对该反应进行实时监控,经对扩增产物做内切酶验证和测序分析,证明RT-LAMP技术的特异性;同时,用10倍系列稀释的RNA样品对该检测方法的灵敏度进行了测试。结果显示:利用RT-LAMP技术成功检测到H5N1禽流感病毒的HA、NA基因区,且RT-LAMP与Real-time PCR结果呈现很好的一致性。此方法的灵敏度可达到能检测10个拷贝RNA分子水平。因此,RT-LAMP技术应用于H5N1亚型禽流感病毒的快速检测是一种可行的方法。

关 键 词：H5N1亚型禽流感病毒 逆转录环介导等温核酸扩增技术  实时监控

分 类 号：R373.1]