文献类型：期刊文章

作　　者：谢芝勋[1] 谢丽基[1] 刘加波[1] 庞耀珊[1] 邓显文[1]

机构地区：[1]广西兽医研究所,广西南宁530001

出　　处：《生物技术通讯》

基　　金：国家百千万人才工程人选专项资金项目(945200603);广西科技攻关项目(桂科攻0719004-3A)

年　　份：2008

卷　　号：19

期　　号：3

起止页码：410-413

语　　种：中文

收录情况：CAS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:建立二重荧光定量RT-PCR方法,用于禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)的检测。方法:根据AIV和NDV的基因保守序列,设计了AIV和NDV的2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针;对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了能够同时检测AIV和NDV的二重荧光定量RT-PCR方法。结果:所建方法特异性好,对AIV和NDV的检测敏感性均达到2000个模板拷贝数,比常规RT-PCR敏感性高100倍;抗干扰能力强,对AIV和NDV不同模板浓度进行组合,仍可有效地同时检测2种病毒。对保存的AIV或NDV鸡胚尿囊液及临床病料进行二重荧光定量RT-PCR检测,结果尿囊液检测的拷贝数均达到1010/μL以上,临床病料的拷贝数为2.13×108～6.52×104/μL。结论:建立了用于检测AIV和NDV的二重荧光定量RT-PCR法,该方法特异、敏感、快速、可定量,对AIV和NDV的防制有重要意义。

关 键 词：禽流感病毒 新城疫病毒 二重荧光定量RT-PCR  

分 类 号：Q78]