文献类型：期刊文章

作　　者：周飞[1,2,3,4] 任建林[1,2,3,4] 卢雅丕[1,2,3,4] 陈美娅[1,2,3,4] 陈建民[1,2,3,4] 刘明[1,2,3,4] 施华秀[1,2,3,4] 张波[1,2,3,4] 董菁[1,2,3,4]

机构地区：[1]厦门大学附属中山医院消化内科 [2]厦门大学消化疾病研究所 [3]厦门市消化疾病中心 [4]福建医科大学教学医院(厦门大学附属中山医院),福建省厦门市361004

出　　处：《世界华人消化杂志》

基　　金：厦门市首批重大疾病科研攻关资助项目;No.WKZ0501;厦门市卫生局医学科研立项资助项目;No.WSK0506;厦门大学引进人才科研启动基金资助项目;No.Z03109;福建省青年科技人才创新项目福建省高校新世纪人才创新资助项目~~

年　　份：2008

卷　　号：16

期　　号：13

起止页码：1378-1382

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、EMBASE、SCOPUS、核心刊

摘　　要：目的:自肝细胞cDNA文库中筛选与HBV主蛋白(SHBs)相互作用的蛋白基因,探讨主蛋白的生物学功能.方法:利用PCR扩增S主蛋白基因,定向克隆技术将靶基因克隆到pDEST32构建出S主蛋白的诱饵质粒;Westernblot方法验证转化诱饵质粒的酵母细胞表达SHBs;将诱饵质粒与人肝cDNA文库猎物质粒共同转化MaV203酵母细胞,在营养缺陷型培养基和X-gal上进行三重筛选阳性菌落,提取阳性酵母菌落的猎物质粒进行DNA测序;利用核苷酸数据库及生物信息学技术,对于筛选结果进行分析.结果:构建S主蛋白及肝文库酵母细胞表达载体,进行酵母双杂交系统筛选人肝细胞cDNA文库,筛选出既能在缺陷培养基也能在X-gal的检测下变成蓝色的真阳性菌落3个,分别为核糖体蛋白L3、微管蛋白α-1a和α-2巨球蛋白.结论:用酵母双杂交技术筛选出3个与SHBs相互作用的肝细胞结合蛋白编码基因,提示SHBs可能参与到肝细胞内部的多种生物学反应.

关 键 词：乙型肝炎病毒 酵母双杂交技术 主蛋白  结合蛋白 聚合酶链式反应

分 类 号：R373]