文献类型：期刊文章

作　　者：张大为[1] 朱进[2] 陈仁杰[1] 冯振卿[3]

机构地区：[1]南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科,江苏南京210029 [2]南京军区军事医学研究所,江苏南京210002 [3]南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏南京210029

出　　处：《南京医科大学学报（自然科学版）》

基　　金：南京医科大学科技发展基金重点项目(2005NYD2D13);南京军区“122”工程资助项目

年　　份：2008

卷　　号：28

期　　号：4

起止页码：420-423

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、IC、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:在大肠杆菌中表达EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)胞外肽段与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并用该融合表达蛋白检测EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者血清中的特异性抗体。方法:用BamHⅠ和EcoRⅠ将含LMP1胞外区重组基因的质粒pMD18-LMP1双酶切后,克隆到pGEX-4T-2中。重组质粒经酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经谷胱甘肽S-转移酶柱亲和层析纯化,纯化的蛋白经Westernblot法检测鉴定。结果:重组表达质粒经酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确。SDS-PAGE和Western blot结果显示表达的重组蛋白分子质量约为32.2ku,此抗原能够与鼻咽癌患者血清中抗体特异性结合。结论:成功获得了LMP1胞外区重组基因表达的蛋白,并证明原核表达的LMP1胞外肽段保持了原有的抗原性,能够与EBV相关鼻咽癌患者血清中的抗体特异性结合。

关 键 词：鼻咽癌  EB病毒 LMP1 胞外区 重组基因

分 类 号：Q786]