文献类型：期刊文章

作　　者：杜秋香[1] 孙俊红[1] 王小伟[1] 王英元[1]

机构地区：[1]山西医科大学法医学院法医病理学教研室,山西太原030001

出　　处：《中国法医学杂志》

基　　金：山西省留学回国人员基金资助项目(200528);山西省青年科技研究基金项目(2007021047)

年　　份：2008

卷　　号：23

期　　号：2

起止页码：111-114

语　　种：中文

收录情况：CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的探索正交设计在实时定量PCR检测条件优化中的应用,找出扩增ICAM-1基因的最佳条件。方法建立大鼠皮肤损伤模型,采用正交设计实时定量PCR的各影响条件,提取损伤处皮肤组织总RNA反转录成cDNA,cDNA作为模板,通过特异性引物扩增ICAM-1基因。对扩增曲线和融解曲线制定评分标准,量化不同实验条件下的扩增结果并进行统计分析。结果退火温度、模板量和引物浓度直接影响扩增效果,但三因素间无相互作用。结果经统计学分析表明退火温度61℃、模板cDNA用量0.4μg和引物终浓度150μmol/L为实时定量PCR检测ICAM-1基因的最佳条件组合。结论正交设计是一种切实可行、快速经济的实时定量PCR检测条件优化方法。

关 键 词：法医病理学 正交设计 实时定量PCR 皮肤损伤 ICAM-1

分 类 号：D919[法医学类]