文献类型：期刊文章

作　　者：杨平[1] 尹烁[2] 崔磊[1] 李宏[2] 吴莹琛[1] 刘伟[1] 曹谊林[1]

机构地区：[1]上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科,上海200011 [2]上海组织工程研究与开发中心

出　　处：《中国修复重建外科杂志》

基　　金：上海市教委2004曙光计划资助项目(04SG44)~~

年　　份：2008

卷　　号：22

期　　号：4

起止页码：481-486

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研究人脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)在体外单层培养条件下诱导为血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的可行性。方法应用酶消化法消化人脂肪组织获得ADSCs,基础培养液培养传代,取第1代细胞用于诱导分化实验。实验分两组,ADSCs以含5ng/mLTGF-β1及50ng/mLPDGF-BB的M-199诱导液联合诱导,作为诱导组;以含10%FBS的M-199培养液培养ADSCs作为未诱导组。镜下观察细胞生长情况;免疫荧光和RT-PCR方法检测平滑肌细胞特异标记的表达情况;流式细胞仪检测诱导阳性率。结果诱导组细胞形态形成平滑肌细胞特有的"峰-谷"生长模式,未诱导组细胞形态未发生改变,与原代ADSCs相似呈成纤维细胞样生长。诱导培养14d,诱导组细胞体外扩增能力较未诱导组显著降低(P<0.01)。免疫荧光检测:诱导组表达平滑肌特异标记α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle-myosin heavy chain,SM-MHC)和Calponin,未诱导组无表达。细胞诱导前α-SMA、SM-MHC及Calponin阳性表达率分别为3.26%±1.31%、3.55%±1.60%、4.02%±1.81%;诱导组阳性表达率分别为48.13%±8.31%、45.33%±10.68%、39.13%±9.42%;诱导前、后差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR检测:诱导组表达平滑肌特异标记α-SMA、SM-MHC、Calponin和SM-22α,未诱导组无表达。结论脂肪干细胞经体外培养及诱导后,呈明显的VSMCs特性,有可能成为血管组织工程新的种子细胞来源。

关 键 词：组织工程血管 脂肪干细胞 平滑肌细胞 细胞诱导

分 类 号：R329]