文献类型：期刊文章

作　　者：胡晓红[1] 彭惠民[1] 刘昕[2] 黄正根[2] 袁科[2]

机构地区：[1]重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室,重庆400016 [2]第三军医大学分子遗传学教研室,重庆400038

出　　处：《重庆医科大学学报》

基　　金：重庆市科委攻关项目(2004-12-1)

年　　份：2008

卷　　号：33

期　　号：2

起止页码：155-158

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、IC、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:比较几种不同的细菌DNA提取方法,建立一种适于PCR和Real-time PCR的细菌DNA提取方法。方法:分别用蛋白酶K法、碱裂解法、Chelex-100+NP40、Chelex-100+TritonX-100法和水煮法提取同种浓度大肠杆菌DNA,测定OD260/280;用不同方法提取不同浓度的大肠杆菌DNA,进行PCR和实时荧光定量PCR扩增,比较灵敏度。结果:5种方法提取细菌DNA,其中Chelex-100+NP40法纯度(OD260/280=1.79±0.03)最高,此方法所提取的DNA产物进行PCR及Real-time PCR扩增未见假阳性及假阴性,其灵敏度为10个/ml细菌浓度。结论:Chelex-100+NP40的细菌DNA提取方法纯度及灵敏度高,且适应于PCR及Real-time PCR。

关 键 词：DNA提取 PCR 实时荧光定量PCR

分 类 号：R394-33]