文献类型：期刊文章

作　　者：胡为民[1] 杨健[1] 唐恩洁[1] 敬保迁[2] 任碧轩[2]

机构地区：[1]川北医学院基础医学院微生物与免疫学教研室 [2]川北医学院免疫学与分子生物学研究所,四川南充637007

出　　处：《川北医学院学报》

年　　份：2008

卷　　号：23

期　　号：1

起止页码：22-25

语　　种：中文

收录情况：CAS、IC、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的构建含人Ⅰ型1-磷酸鞘氨醇受体(SIPI)-全长cDNA序列及HA和/或EGFP标签的真核表达载体,并观察其在HEK293细胞上的表达。方法合成2条HA寡核苷酸,克隆入S1P1-Myc-EGFP-N1载体。以HA-S1P1-Myc-EGFP-N1为模板,用PCR的方法扩增HA-S1P1并克隆入pcDNA3.1(+)载体。限制性酶切消化、PCR、测序的方法鉴定,载体经Polyfect转染入HEK293细胞。G418筛选出稳定细胞株。用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测S1P1在HEK293细胞上的表达。结果限制性酶切消化、PCR、测序结果证实载体构建成功。S1P1表达在HEK293稳定细胞株的表面。结论成功构建带有HA和/或EGFP标签的S1P1真核表达载体,表面表达S1P1的HEK293稳定细胞株可作为我们进一步研究的细胞模型。

关 键 词：S1P1  真核表达载体 HEK293细胞

分 类 号：R392.1]