文献类型：期刊文章

作　　者：徐珊珊[1] 阎春兰[2] 刘黎明[1] 曾群力[1]

机构地区：[1]浙江大学医学院浙江省生物电磁学重点实验室 [2]毒理学教研室,浙江杭州310058

出　　处：《浙江大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金重点项目(50137030);国家自然科学基金面上项目(30170792);浙江省科技攻关重点科研项目(021106135);浙江省自然科学基金面上项目(301524);浙江省卫生厅重点项目(2004ZD006)

年　　份：2008

卷　　号：37

期　　号：1

起止页码：45-50

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的：观察不同细胞裂解液对Bradford法和bicinchoninic acid（BCA）法的影响，以确定适合蛋白质组学研究中细胞全蛋白含量的定量方法。方法：采用Bradford法和BCA法测定牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）样品溶液，样品BSA溶液分别由双蒸水和不同裂解液（荧光差异双向凝胶电泳裂解液、三种传统双向凝胶电泳裂解液）配制；然后，采用这两种方法测定上述裂解液所提取的细胞全蛋白样品；采用Bradford法定量反复冻融、不同比色杯和不同时期标准曲线下的样品。结果：各细胞裂解液对Bradford法均有显著性影响，使所定量的BSA浓度普遍偏高1．2至2倍，但定量值可随着加样浓度的增加而增加（r=0．989～0．996，P〈0．05）；各裂解液对BCA法也均有显著性的干扰，多数定量结果超出仪器读数范围；对于同批全蛋白溶液样品，BCA法的定量结果与Bradford法相比可有千倍差异；反复冻融后蛋白浓度变化统计学上无显著性差异，但有下降趋势，不同比色杯和不同时期标准曲线对Bradford法无显著影响。结论：Bradford法是蛋白质组学中细胞全蛋白定量的较适方法，但需根据具体实验进行优化。

关 键 词：蛋白质组学 蛋白质类/分析  电泳 凝胶 双向  血清白蛋白 牛  

分 类 号：R446.1]