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家蚕脑核蛋白抽提及其与PTTH基因启动子的凝胶阻滞分析
Extraction of Nuclear Proteins from the Brains of Bombyx mori and Electrophoretic Mobility Shift Assay with Promoter of PTTH Gene
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]合肥工业大学生物与食品工程学院生物工程系,合肥230009 [2]西南大学农业部蚕桑学重点实验室,重庆400716
基 金:国家自然科学基金(30500374);国家重点基础研究发展计划“973”项目(2005CB121000);教育部新世纪优秀人才基金(2007)
年 份:2008
卷 号:41
期 号:1
起止页码:265-271
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、FSTA、IC、JST、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:【目的】转录调控对于明确昆虫许多生理过程如抗药性、抗病性、行为、进化及发育等方面的机理具有重要意义。家蚕PTTH是调控生长发育的重要神经肽,明确其转录调控机理对阐明其表达的发育和组织特异性具有重要价值。【方法】本文克隆并测定了家蚕PTTH启动子序列,利用Matinspector分析软件预测该片段可能包含的顺式作用元件,采用高糖抽提缓冲液抽提家蚕脑核蛋白;标记PTTH启动子片段进行凝胶阻滞分析。【结果】家蚕PTTH启动子分析含有MEF2、TATA box、pbx-1等元件;抽提获得理想的脑核蛋白,脑核蛋白可以与PTTH转录起始位点附件119bp的序列特异地结合,把TATA Box的TATATAA突变后,脑核蛋白与突变后的探针MBS2不能结合。【结论】表明本研究中抽提的脑核蛋白是有效的,首次检测家蚕PTTH启动子可以与转录因子特异结合,初步鉴定了TATA Box。
关 键 词:核蛋白 凝胶阻抑分析 PTTH基因 家蚕
分 类 号:Q966]
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