文献类型：期刊文章

作　　者：吴鑫[1,2,3] 雷天刚[4,3] 何永睿[4,3] 刘小丰[4,3] 许兰珍[4,3] 彭爱红[4,3] 陈善春[4,3]

机构地区：[1]西南大学园艺园林学院 [2]西南大学柑桔研究所,重庆,400712 [3]国家柑桔品种改良中心,重庆,400712 [4]西南大学柑桔研究所

出　　处：《分子植物育种》

基　　金：科技部科研院所社会公益研究专项(2004DIB45147);重庆市科技攻关重点项目(CSTC,2006AB1009);国家863项目(2006AA100108-4-12-4)资助

年　　份：2008

卷　　号：6

期　　号：1

起止页码：170-176

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：通过对PCR反应程序、反应体系(DNA模板量、PCR反应体积、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶用量、引物量)、电泳检测方法的系统优化,建立了柑桔SRAP-PCR和ISSR-PCR体系;以此进行大规模引物筛选,从而建立了柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系。SRAP-PCR:25μL体系,模板DNA25ng,Tris-HCl10mmol/L,KCl50mmol/L,Mg2+1.2mmol/L,dNTP120μmol/L,Taq酶1.5U,引物0.4μmol/L,反应程序为94℃预变性5min,35个循环(94℃30s,47℃1min,72℃1min),72℃延伸10min;ISSR-PCR:25μL体系,模板DNA25ng,Tris-HCl10mmol/L,KCl50mmol/L,Mg2+1.6mmol/L,dNTP200μmol/L,Taq酶1U,引物0.8μmol/L。筛选出稳定性好、多态性高的24对SRAP引物和13条ISSR引物。

关 键 词：柑桔 SRAP ISSR 建立  优化  

分 类 号：S666]