文献类型：期刊文章

作　　者：陆海荣[1] 李国栋[1] 吴宏宇[1] 黄晋江[1] 汪世龙[2] 黄青山[1]

机构地区：[1]上海高科联合生物技术研发有限公司,上海201206 [2]同济大学生命科学与技术学院蛋白质研究所,上海200092

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：上海市重点科技攻关项目(No．0443 19223)~~

年　　份：2008

卷　　号：24

期　　号：1

起止页码：21-26

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为高效表达抗菌肽GK1并避免GK1的高抗菌活性对大肠杆菌宿主菌的致命影响,将经改造后的人胰岛素原(mhPI)与GKJ的融合基因(mhPI-GKI)克隆到表达载体pET28a中,构建出表达质粒pET28a-mhPI-GK1,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。融合蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的20%。经CNBr裂解、阳离子交换层析和RP-HPLC纯化后,每升发酵液可获得5.7 mg纯度大于97%的重组GK1。质谱检测显示重组GK1的分子量为2794.0 D,抑菌活性实验表明纯化后的重组GK1和化学合成GK1具有相同的抗菌活性。为利用基因工程方法大规模生产GK1奠定了基础。

关 键 词：抗菌肽 融合蛋白 大肠杆菌

分 类 号：Q78]