期刊文章详细信息
H3、H5、H7、H9亚型流感病毒通用多表位核酸疫苗构建及表达研究
Construction and expression of multiple epitopes DNA vaccines of influenza A virus H3579 subtypes
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]军事医学科学院十一所全军基因工程重点实验室,长春130062
基 金:863计划项目(2006AA10A205);教育部重点项目(306006);吉林省科技发展重大项目(20065020);长春市科技计划项目(04-02GG217)
年 份:2007
卷 号:27
期 号:12
起止页码:1136-1138
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的构建表达A型流感病毒多种表位的核酸疫苗,并研究其在幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)内表达产物的生物学活性。方法筛选流感病毒主要抗原(HA、NA、NP、M)表位基因,以生物信息学软件优化其排列结构,合成流感通用的复合多表位基因(Epi),以H5、H7亚型流感病毒HA融合表达基因为骨架,将多表位基因Epi插入构建H7HA-Epi-H5HA阅读盒,定向克隆至pVAX1,构建抗A型流感H3579亚型的pVAX1-H7HA-Epi-H5HA。最后将该重组质粒转染BHK细胞,提取细胞总RNA,以RT-PCR方法检测目的基因;以间接免疫荧光试验(IFA)初步测其表达产物抗原性。结果RT-PCR检测到目的基因;IFA检测到特异性荧光存在。结论本试验所构建的重组质粒pVAX1-H7HA-Epi- H5HA,在真核细胞内均获了有效地转录和表达;而且其表达产物均能与相应的抗体特异性结合,证明了其具有一定的生物学活性和抗原性,有望成为抗多种A型流感病毒的通用核酸疫苗。
关 键 词:表位 流感病毒 核酸疫苗
分 类 号:R392]
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