文献类型：期刊文章

作　　者：刘玉[1] 孙钦峰[2] 杨丕山[2] 杜芳[2]

机构地区：[1]南京大学医学院附属口腔医院,江苏南京210008 [2]山东大学口腔医学院牙周病科,山东济南250012

出　　处：《上海口腔医学》

基　　金：山东省自然科学基金(Y2006C125)

年　　份：2007

卷　　号：16

期　　号：6

起止页码：627-631

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:构建含增强型绿色荧光蛋白的重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)基因真核表达质粒。方法:采用PCR方法扩增rhBMP-2基因,并在两端添加合适的酶切位点;利用定向克隆技术将rhBMP-2基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因分别插入到载体pIRES的上下游多克隆位点中,两者通过IRES连接,以防止融合表达;重组的pIRES-rhBMP2-EGFP在大肠杆菌DH5α内扩增后,通过酶切电泳鉴定和DNA测序证明质粒构建成功。结果:通过对重组质粒pIRES-rhBMP2-EGFP进行酶切鉴定以及DNA序列测定分析,证明真核表达重组质粒pIRES-rhBMP2-EGFP构建成功,开放阅读框架正确。结论:利用PCR、T/A克隆等分子生物学技术,可成功地将编码rhBMP-2的DNA片段和EGFP片段克隆到载体pIRES中,构建出重组子pIRES-rhBMP2-EGFP。

关 键 词：人骨形成蛋白-2(hBMP-2)  质粒  绿色荧光蛋白

分 类 号：R78[口腔医学类]