文献类型：期刊文章

作　　者：娄忠子[1] 王天户[1] 董李民[2] 刘思当[1]

机构地区：[1]山东农业大学动物科技学院基础兽医系,山东泰安271018 [2]莱阳市河洛镇兽医站,山东莱阳265200

出　　处：《山东农业大学学报（自然科学版）》

年　　份：2007

卷　　号：38

期　　号：4

起止页码：509-514

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CSCD、CSCD_E2011_2012、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒（PCV2）检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株（PCV2 sdt）。间接免疫荧光试验（IFA）检测可见接种病毒细胞中散在特异性荧光。提取全基因组为模板,进行病毒基因组1号开放阅读框（ORF1）、2号开放阅读框（ORF2）和全基因组序列扩增,得到长度分别约为999bp、749bp和1767bp左右的产物条带。将产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-ORF1、pMD18-T-ORF2和pMD18-T-PCV2。测序结果显示,所分离病毒的ORF1、ORF2和全基因组序列长度分别为945bp、702bp和1767bp。DNAStar生物学软件分析发现,PCV2分离毒株与参考株的全基因组同源性介于95.4%-98.8%之间,ORF1的同源性介于97.0%-98.8%,ORF2的同源性略低,介于91.9%-98.4%之间。

关 键 词：猪Ⅱ型圆环病毒  双抗体夹心ELISA PCR 病毒分离 间接免疫荧光试验

分 类 号：S852.651]