文献类型：期刊文章

作　　者：陈嘉[1] 孙京臣[2] 邹移海[1] 张进[3] 黄冰[4]

机构地区：[1]广州中医药大学实验动物中心,广东广州510405 [2]华南农业大学动物科学学院,广东广州510642 [3]广州中医药大学基础医学院,广东广州510405 [4]中山大学中山眼科中心,广东广州510060

出　　处：《第四军医大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(30500645);广东省自然科学基金(7006695)

年　　份：2007

卷　　号：28

期　　号：23

起止页码：2152-2155

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、IC、JST、ZR、核心刊

摘　　要：目的:体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),并研究中药单体丹酚酸B诱导MSCs向心肌样细胞分化.方法:用贴壁培养法分离、培养、纯化MSCs,免疫荧光法检测细胞抗原CD44和CD34.分别用含5μmol/L的5-氮胞苷(5-aza)和30mg/L丹酚酸B的低糖DMEM培养液培养MSCs24h后,RT-PCR法检测培养1,7,14和21d心肌特异性转录因子NKX2.5,GATA-4和心肌特异性蛋白α-actin mR-NA的表达,用免疫荧光法检测诱导后α-actin的表达情况.结果:获得纯化的MSCs,免疫荧光检测细胞表面标记CD44呈阳性,CD34呈阴性.诱导后细胞形态逐渐发生变化.RT-PCR显示NKX2.5和GATA-4 mRNA在MSCs有基础性的表达,而分别以5-aza和丹酚酸B处理24h后,NKX2.5和GATA-4 mRNA表达增强,7d时表达达高峰,以后维持在高水平,与空白对照组相比,有统计学差异(P<0.01).未诱导的MSCsα-actin mRNA表达呈阴性,丹酚酸B诱导后的第14日,出现α-actin mRNA的表达.结论:用贴壁培养法可获得纯化的MSCs,丹酚酸B可诱导MSCs向心肌样细胞分化.

关 键 词：骨髓间充质干细胞 细胞培养 丹酚酸B 心肌细胞

分 类 号：R285.5[中药学类]