文献类型：期刊文章

作　　者：李文生[1] 刘红莉[2] 张盈涛[2] 杨筱风[2] 王一理[2] 司履生[2]

机构地区：[1]陕西省人民医院西安交通大学医学院第三附属医院,陕西西安710068 [2]西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所环境与疾病相关基因教育部重点实验室,陕西西安710061

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30271184);国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2001AA215221)

年　　份：2007

卷　　号：23

期　　号：12

起止页码：1163-1166

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:构建预防性重组HPV58-减毒志贺氏杆菌载体活疫苗,并研究其免疫学特性。方法:克隆HPV58L1基因并重组入自杀载体pCVD442,减毒志贺氏杆菌Sf301:ΔvirG、辅助质粒PRK2013、重组自杀载体pCVD442-HPV58L1进行筛选杂交,经氨苄抗性培养基、刚果红培养基双重选择,获得重组的含HPV58L1基因的减毒志贺氏杆菌菌株。Western blot检测HPV58L1蛋白表达。用豚鼠角结膜炎模型进行疫苗动物免疫试验,ELISA检测豚鼠血清中特异性抗体,ELISPOT检测豚鼠脾及淋巴结中抗原特异性IgG、IgA产生细胞频数。结果:Western blot法证实该菌株可表达HPV58L1蛋白。豚鼠免疫保护试验发现:HPV58L1-减毒志贺氏杆菌不引起角结膜炎,经用野生型sf301攻击后有80%豚鼠不发病。免疫后第20天,免疫豚鼠血中抗HPV58L1特异性IgG、IgA明显升高,而对志贺氏杆菌菌体抗原(LPS)仅产生低效价的IgG抗体。ELISPOT结果显示,脾和淋巴结的IgA-ASC及IgG-ASC明显升高。结论:成功构建了预防性重组HPV58-减毒志贺氏杆菌载体活疫苗,能诱发免疫动物较强的体液免疫反应,激发保护性抗体的产生。

关 键 词：HPV58  减毒志贺氏杆菌  疫苗 同源重组

分 类 号：R392.11]