文献类型：期刊文章

作　　者：杨柳[1] 苏哲[2] 岳乔红[1] 周萍[3] 苏明权[1] 刘家云[1] 郝晓柯[1]

机构地区：[1]第四军医大学西京医院,西安710032 [2]宝鸡解放军第三医院,宝鸡721004 [3]交通大学第一医院,西安710061

出　　处：《中国防痨杂志》

年　　份：2007

卷　　号：29

期　　号：1

起止页码：12-14

语　　种：中文

收录情况：CAS、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的克隆表达结核分枝杆菌促Rv1009基因,序列测定正确后进行融合、表达。方法采用热启动聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1009编码基因,用限制性内切酶消化后插入pGEX 4T-2载体中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3),目的基因经IPTG诱导,表达Rv1009基因蛋白。结果经PCR扩增在1300bp处发现一条目的片段,获得了结核分枝杆菌H37Rv株Rv1009基因蛋白,经诱导后高效表达分子量为64KD的外源蛋白,与预期分子量大小一致,凝胶自动扫描分析,在A600值为0．6,IPTG终浓度为0．3 mmol／L,诱导表达3 h时融合蛋白表达量即达峰值,占菌体总蛋白的22．8％。结论构建了结核分枝杆菌Rv1009基因重组表达载体,获得了RPF样融合蛋白的高效表达,为今后深入研究奠定了基础。

关 键 词：分枝杆菌,结核  Rv1009基因  克隆 表达  

分 类 号：R378]