文献类型：期刊文章

作　　者：李海[1] 彭宇[1] 黎晓天[1] 吴文言[1]

机构地区：[1]中山大学生命科学学院生物医药中心,广州510275

出　　处：《中国生物工程杂志》

基　　金：广东省科技攻关资助项目(2005B10401046;2006B35501002);广州市科技攻关资助项目(2006Z3-E4101)

年　　份：2007

卷　　号：27

期　　号：10

起止页码：12-16

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：Survivin蛋白抑制细胞的凋亡并参与调控细胞的分裂,在绝大多数肿瘤细胞中均有过量表达。本实验以人肝癌细胞系MHCC-97L总RNA为模板,应用RT-PCR的方法得到survivinc DNA,并构建了重组原核表达载体pET-21b(+)-survivin,导入BL21(DE3)菌株进行表达,表达产物以包涵体形式存在,表达量超过总蛋白的60%。Western blot结果表明表达产物与抗人survivin抗体发生特异性反应,经凝胶过滤层析后纯度达到95%以上,为进一步研究靶向Survivin的诊断试剂与抑制剂奠定了基础。

关 键 词：SURVIVIN 克隆 原核表达 纯化

分 类 号：Q789]