文献类型：期刊文章

作　　者：宋世斌[1,2] 景志忠[1] 陈国华[1] 王笑笑[1,2] 宗瑞谦[2]

机构地区：[1]中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃省动物寄生虫病重点实验室,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州730046 [2]甘肃农业大学动物医学院,兰州730070

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：国家高技术研究与发展项目(No.2006AA10A203);兰州市科技攻关项目(Nos.05-1-47和06-2-23)资助~~

年　　份：2007

卷　　号：23

期　　号：5

起止页码：818-823

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：采用PCR方法从pGEM-IL-18重组质粒中扩增出IL-18基因并构建真核融合表达载体pPIC9K-IL-18,电激法转化入毕赤酵母GS115,采用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,并将表达蛋白用凝胶层析柱纯化后,用MTT法检测其生物学活性。实验结果表明重组的GS115酵母菌株可表达分泌pIL-18,其表达在72h时达高峰,分泌量可达160mg/L,纯化的重组pIL-18蛋白具有显著的促进淋巴细胞增殖的活性,说明本试验已在毕赤酵母中在国内首次成功表达了具有生物学活性的pIL-18。

关 键 词：pIL-18  毕赤酵母 基因表达 纯化 生物活性

分 类 号：Q78] S852.4]