文献类型：期刊文章

作　　者：颜邦芬[1] 陈锃[1] 张书环[1] 林祥梅[2] 陈颖钰[1] 晁彦杰[1] 李德学[3] 宋念华[3] 陈焕春[1] 郭爱珍[1]

机构地区：[1]华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 [2]中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所,北京100029 [3]湖北省动物疫病诊断中心,武汉430064

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：国家"十一五"科技攻关奶业重大专项(No.2006BAD04A12)~~

年　　份：2007

卷　　号：23

期　　号：5

起止页码：806-811

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）基因组DNA为模板,PCR扩增gG基因,克隆到T载体pMD18-T,经限制性酶切分析及序列测定鉴定正确后,进一步亚克隆至原核表达载体pGEX-KG。SDS-PAGE和Western blot分析表明,该基因在大肠杆菌BL21（DE3）中呈可溶性及包涵体两种形式表达,重组蛋白质具有免疫学活性。包涵体蛋白经提纯、变性、复性后,作为包被抗原建立了gG-ELISA诊断方法。应用该方法与进口试剂盒（IDEXX）平行检测380份血清样品,两种方法的符合率为92%（351/380）。对6份病毒分离阳性血清的检测均为阳性,对非相关病原的阳性血清及中监所的阴性血清检测均为阴性,表明所建立的IBRVgG抗体的ELISA检测具有良好的灵敏度与特异性。对1248份奶牛血清样本进行了检测,进口牛群的IBRV抗体阳性率平均为21.7%,湖北本地中国黑白花奶牛的抗体阳性率在不同牧场之间变化很大,范围为0.0%-41.5%。

关 键 词：牛传染性鼻气管炎病毒 gG基因  ELISA 原核表达

分 类 号：S852.65]