文献类型：期刊文章

作　　者：顿继凤[1] 周迎春[1] 蒲娟[1] 刘金华[1]

机构地区：[1]中国农业大学动物医学院预防兽医系,北京100094

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.30599431;30471282);国家重点基础研究发展规划(973)项目(No.2005CB523003)资助

年　　份：2007

卷　　号：15

期　　号：4

起止页码：547-551

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：从质粒pGEM-HA中扩增H5N1亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)血凝素(Hemagglutinin,HA)基因,构建转移载体pFastBacHT-HA并与大肠杆菌(Escherichia coli)DH10Bac中的Bacmid质粒重组,构建重组转座质粒rBacmid-HA。在脂质体介导下将rBacmid-HA转染sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。在sf9昆虫细胞中表达HA蛋白,通过SDS-PAGE、Western blot和血细胞吸附试验鉴定重组蛋白。结果显示,重组HA蛋白分子量约为66kD,该蛋白与AIVH5亚型鸡血清发生特异性反应,与H7和H9亚型鸡血清不反应,转染重组杆状病毒后的细胞能吸附鸡的红血球,证明HA基因在sf9昆虫细胞中获得了正确表达,不仅具有亚型特异性,而且有良好的生物反应性。

关 键 词：禽流感 H5N1 血凝素 昆虫细胞杆状病毒表达系统  表达  

分 类 号：S188]