文献类型：期刊文章

作　　者：李桂军[1] 楼永良[1] 严杰[2]

机构地区：[1]温州医学院检验学院温州医学院微生态学研究所,温州325035 [2]浙江大学医学院病原生物学教研室,杭州310003

出　　处：《中国人兽共患病学报》

基　　金：浙江省自然科学基金项目(X205004)

年　　份：2007

卷　　号：23

期　　号：9

起止页码：852-854

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的用大肠杆菌表达系统表达创伤弧菌溶细胞素,并对其溶血活性进行评价。为今后的免疫学活性研究和单克隆检测试剂盒的研发奠定基础。方法构建pET28a(+)-vvhA表达载体,对包涵体进行三步洗涤后,用金属亲合层析(HisTag)纯化重组蛋白,并用溶血试验验证重组蛋白活性。结果用基因工程的方法成功获得高表达、高纯度(纯度≥96%)重组蛋白VVC。利用兔红细胞溶血试验检测表明,重组蛋白具有溶血活性,其活性为0.2μg/HU。结论成功用大肠杆菌表达系统表达创伤弧菌溶细胞素并对其纯化、复性条件进行优化。

关 键 词：创伤弧菌溶细胞素 E.coli表达  溶血活性

分 类 号：R378.2]