文献类型：期刊文章

作　　者：叶雯[1] 徐旭东[1]

机构地区：[1]中国药科大学生命科学与技术学院微生物学教研室,江苏南京210009

出　　处：《药物生物技术》

年　　份：2007

卷　　号：14

期　　号：4

起止页码：245-248

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：为提高乳清酸到三磷酸胞苷(CTp)的转化效率,克隆并表达了编码CTP合成酶(CTPS)的基因pyrG。根据Genbank的资料,设计了pyrG的引物,经PCR扩增、酶切后,将pyrG插入到表达载体pET-28a中,构建了重组质粒pET28a-pyrG,然后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,乳糖诱导表达后,经SDS-PAGE对表达产物进行分子量鉴定。分离纯化后,对表达产物CTPS进行活性测定,并对转化工艺进行初步研究。结果:构建的工程菌产生了一种相对分子质量在60.0k的蛋白,该蛋白显示出CTPS的活性,并且可以转化乳清酸为CTP。

关 键 词：三磷酸胞苷合成酶基因  克隆表达 酶活测定 三磷酸胞苷合成  

分 类 号：Q7]