期刊文章详细信息
一种高效构建同源重组DNA片段的方法——融合PCR
A Rapid Method for Generation of Homologous Recombinant Fragments—Fusion PCR
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]哈尔滨工业大学生命科学与工程系,哈尔滨150001
年 份:2007
卷 号:27
期 号:8
起止页码:53-58
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:融合PCR技术(fusion PCR)采用具有互补末端的引物,形成具有重叠链的PCR产物,通过PCR产物重叠链的延伸,从而将不同来源的任意DNA片段连接起来,此技术在不需要内切酶消化和连接酶处理的条件下实现DNA片段的体外连接,为同源重组片段的构建提供了快速简捷的途径。对原有的融合PCR技术进行改进,以3个同源重组线性DNA片段的构建为例,详细论述了改进的融合PCR技术的反应过程及技术体系。结果表明,改进的融合PCR技术可以同时进行3个片段及4个片段的融合反应,产物长度均在4.5kb以上,各同源重组片段在扩增过程中均无突变发生,获得的片段可以用于后续实验分析。
关 键 词:融合PCR 重组片段 同源臂 抗性基因
分 类 号:Q784]
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