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β1-4半乳糖基转移酶检测方法的建立及动力学研究
Studies on the Method for the Determination of β1-4 Galactosyltransferase and Its Kinetics
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]上海医科大学卫生部糖复合物重点实验室
基 金:国家自然科学基金(39570176;39470164)资助项目
年 份:1997
卷 号:29
期 号:1
起止页码:1-7
语 种:中文
收录情况:BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RSC、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊
摘 要:本文分离纯化了人IgG的糖肽,去掉末端唾液酸和半乳糖,经肼解和荧光标记,用HPLC纯化了荧光标记的底物[Gnβ1-2Mα1-6(Gnβ1-2Mα1-3)Mβ1-4Gnβ1-4Gn-PA]。用正常雄性大鼠的肝细胞的微粒体作为酶源,建立了β1-4半乳糖基转移酶(β1-4GT)的荧光标记底物的HPLC测定方法,并确定了它的最适pH为6.5,最佳Triton X-100浓度为0.5%。然后用正常雄性大鼠的肝细胞的高尔基体作为酶源,测定了底物的K_m和V_(max)值,K_m=2.31×10^(-3)(mol/L)^(-1),V_(max)=5.75×10^(-2)μmol/(min·mg)。并发现了β1—4GT和α1—3甘露糖天线的N-乙酰氨基葡萄糖基比α1—6天线的反应性强2.10倍左右。
关 键 词:β1-4 半乳糖基转移酶 检测方法 动力学
分 类 号:Q555.403]
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