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抗大肠杆菌curli菌毛CsgA蛋白特异性抗体的制备及鉴定
Preparation and identification of antisera specific against curli major subunit CsgA in Escheriachia coli
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]广西医科大学微生物学与免疫学教研室,南宁530021 [2]瑞典卡罗琳斯卡医学院生理学和药理学教研室
基 金:教育部"春晖计划"项目(教外司留[2003]593号);广西自然科学基金(桂科自0542076)资助
年 份:2007
卷 号:23
期 号:4
起止页码:370-372
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的为进一步研究curli菌毛主要蛋白CsgA的功能,利用MBP-CsgA融合蛋白免疫兔子制备抗体。方法用PCR方法扩增大肠杆菌MHC4100株的csgA基因,在大肠杆菌中表达MBP-CsgA融合蛋白,免疫家兔以制备抗血清,用Westernblotting和免疫电镜鉴定抗MBP-CsgA融合蛋白抗体的特异性。结果PCR扩增出约476 bp的csgA基因,在大肠杆菌XL1-Blue中成功地表达了Mr约为58 000的MBP-CsgAⅢ融合蛋白,Western blotting和免疫电镜检测证明,针对MBP-CsgA融合蛋白的抗血清,不仅可特异性地识别MBP-CsgA,也可识别源于大肠杆菌的csgA蛋白,抗血清的最高滴度达1∶50 000。结论亚克隆csgA基因,成功表达MBP-CsgA融合蛋白,制备并获得其特异性抗curli菌毛抗体。
关 键 词:csgA MBP-CsgAⅢ融合蛋白 多克隆抗体
分 类 号:R392]
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