文献类型：期刊文章

作　　者：柴锡庆[1] 刘凌云[1] 郑龙[2] 王俊霞[2] 程桂花[3] 杨涛[1]

机构地区：[1]河北医科大学研究生院,石家庄050017 [2]河北省实验动物中心,石家庄050017 [3]河北化工医药职业技术学院,石家庄050000

出　　处：《第二军医大学学报》

年　　份：2007

卷　　号：28

期　　号：6

起止页码：633-636

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:构建重组人缺氧诱导因子-1α腺相关病毒载体(rAAV-HIF-1α).并观察其在原代培养海马神经细胞中的表达。方法:构建含人类HIF-1α基因的AAV载体质粒pSNAV-HIF-1α.转染BHK21细胞并选择培养获得的G418抗性细胞,即AAV载体细胞株.以重组单纯疱疹病毒感染此细胞株获得rAAV-HIF-1α,PCR技术鉴定病毒.地高辛标记的CMV探针点杂交方法测定重组病毒滴度.SDS-PAGE电泳测定病毒纯度.Western印迹检测目的蛋白的表达。结果:PCR证实rAAV- HIF-1α内含有人HIF-1α基因序列,病毒滴度为1×10^(12)/ml.纯度大干98%,感染原代培养海马神经细胞后能够表达目的蛋白。结论:成功构建了rAAV-HIF-1α,为进一步应用该基因进行临床基因治疗提供了实验依据。

关 键 词：缺氧诱导因子-1Α 原代培养 海马 腺相关病毒

分 类 号：R338.2]